所有這些測定法在液體環境中均具有不溶性成分(顆粒),因此可以通過濁度進行測定。濁度定義為由懸浮的不溶性顆粒引起的液體渾濁或渾濁。雖然一些懸浮顆粒足夠重,可以迅速沉降到液體中,但小顆粒只能沉降得很慢。這些非常小的不溶性顆粒會導致液體變渾濁。
濁度的測量是水質特別是飲用水的關鍵測試。然而,濁度在生命科學,生物化學以及醫學和藥物化學中也有大量應用。
濁度可以通過兩種方法測量。**種方法主要適用于細菌生長測定,通常通過檢測600 nm(OD600)吸光度中的光散射來測量。在這種情況下,用于測量通過樣品的光透射率的吸光度酶標儀可作為濁度計。細菌散射光產生的吸光度或光密度(OD)的測量實際上是濁度的測量。
通常,對于細菌生長檢測,用OD600進行濁度測量優于紫外光譜,因為在600 nm波長下進行檢測不會像紫外線那樣損害細胞。另一方面,用紫外線照射也可能導致DNA突變。
樣品越混濁,穿過的光量就越少。這種關系是成正比的,可以用來計算樣品在一定程度上的濁度。實際上,在大多數吸光度讀取器中,濁度測量通常開始偏離直接的線性關系,而不再是大于3 OD值的光透射率,因為幾乎沒有光(很少的光子)可以穿過樣品。
可選地,濁度也可以用專門測量光散射的專用儀器,即濁度計來檢測。
比濁法檢測是基于將光束引導通過樣品的二極管激光器。如果溶液中沒有不溶性顆粒,則光束將簡單地通過。設置在激光束路徑一側(通常呈90°角)的檢測器將不會測量到濁度。如果溶液中存在固態的不溶物,則激光束將被粒子沿不同方向散射,并且光學系統將收集散射光并將其引導至檢測器。散射光束的粒子數量越高,到達檢測器的光越多,將測量的濁度濁度單位(NTU)越多。實際上,在濁度法中,顆粒密度是導向檢測器的散射光的函數。
在某種程度上,給定密度的粒子的光散射能力取決于諸如粒子顏色,形狀和反射率之類的屬性。至于在600 nm處的吸光度檢測,在濁度法中,散射光的量也與溶液中不溶性顆粒的量成正比。但是,基于濁度計的光散射測量不受上述限制的影響,從而為濁度測量提供了更寬的動態范圍。
如開始時所提到的,濁度檢測主要用于制藥實驗室以測試藥物的溶解度,而生化實驗室則用于蛋白質-蛋白質相互作用,蛋白質聚集和聚合研究。在免疫學中,濁度檢測在新抗體的開發及其與抗原的結合能力方面具有主要應用。